Sodobne zamisli o vlogi protiteles proti kolagena - sistemski eritematozni lupus, sistemska skleroza, revmatoidni artritis

POGLAVJE I
Sodobne zamisli o vlogi protiteles proti kolagena v razvoju sistemskega lupus erythematosus, sistemske skleroze in revmatoidnega artritisa
Kolagen je glavna sestavina vezivnega tkiva, je več kot 30% od celotne mase telesa proteina v humani in okoli 40% pa jih je na koži, približno 50% - skeletnih tkiv in 10% - v strome notranjih organov.
V veliki večini kolagena tkiva je sestavljena iz kolagenskih vlaken. V zadnjih letih nabralo veliko količino informacij o strukturi, specifičnosti in metabolizem kolagena. Če v letu 1987 je bilo 12 znanih vrst kolagena, danes pa je študiral 16 vrst.
Individualno kolagen molekula sestoji iz treh polipeptidnih verig spiralized, imenovanih alfa verige, ki se zvije skupaj v skupno vijačnice in stabiliziranih z vodikovimi vezmi. kolagenska molekula relativno molekulsko maso 300.000 daltonov, dolžine 280 nm in debelino 1,4 nm. Vsaka alfa veriga vsebuje v povprečju od približno 1000 aminokislinskih ostankov. Funkcija razpoznavna je prisotnost kolagena hidroksiprolina in hidroksilizin (kolagen kemičnih markerjev), pomanjkanje triptofana, nizko tirozina in metionin, ki imajo visoko vsebnost glicina (približno eno tretjino aminokislin) in prolin in hidroksiprolina (četrt). Končni odseki alfa verige v N- in C-terminalov molekule (telopeptidi) se razlikujejo od glavnega dela sestavka aminokislinske. Ne vsebuje prolin in Hidroksiprolin, imajo glicin v vsakem tretjem mestu, in zato ne tvori trojno vijačnico. Nonspiral odseki pripisujejo posebno vlogo v mehanizmu polimerizacije molekul v fibrila, tvorba intermolekularno zamreženje v antigenske lastnosti kolagena (Piez K. A.,] 976). Najpomembnejši dosežek v zadnjih letih, je odkritje kolagena heterogenosti. Iz različnih tkivih izolirali 16 genetsko različne vrste kolagena. Razlikujeta se v kombinaciji petih trojne vijačne molekule alfa verige, ki jih kodirajo različne gene in imajo nekatere značilnosti primarne konstrukcije (Gay S. Miller T.G., 1978), sintezo vsake od alfa-verige genskega lokusov določena.
Kolagen se sintetizira predvsem v fibroblastih in lokalnih sort. Po zadnjih podatkih, kolagen bazalne membrane, proizvedene kot endotelijskih in epitelijskih celic (Chang, E., 1976, Jaffe AE, 1976). Kolagen je tudi v kulturi mioblaste (LiptonB.H., 1977).
Imunohistološka študije so pokazale, da lahko sintetizirajo fibroblast in vrste I in kolagena III. Prokolagena kolagen najprej vstopi v celici s posebnimi proteaze ekstracelularno nato (Miller F. I., 1978). Prokolagena razlikuje od kolagena z reakcijo s specifičnimi protitelesi (Novak N., 1976).
Imunološke razlike med različnimi vrstami kolagena so dovoljene v zadnjih letih, zahvaljujoč immunomorphological metodah z uporabo protiteles tip značilne za študij lokalizacije različnih vrst kolagena v veznih struktur tkiva.
Kolagena tipa I je vsebovana predvsem v kosti, vezi, sklepne kapsule. Koža prednostno vsebuje humani kolagena tipa I (Epstein E, N. in sod., 1975), v znatnih količinah, je prav tako del vezivnega tkiva pljučnih alveolov, stene žil, črevesja stene. Sestavek jetra, pljuča, ledvica in vranico vključuje kolagena tipa I v kombinaciji s kolagenom tipa III (Lapiere S. M. et!., 1976- Steffen, S., 1990). Spojni hrustančnega tkiva sestoji večinoma iz kombinacije tipov kolagenskih 1 in II. Sklepna membrana vsebuje kolagena tipa I in tipa III kolagen je manjša od ali kolagenske tipe I in III v ekvivalentnih količinah (Eyre R, et al., 1975).
Tkanine (vključno z imunsko) specifičnost kolagena, se zdi, da igrajo vlogo v patologiji. Možno je, da imunski specifičnost različnih vrst kolagena v veliki meri določa prevladujočo postopek lokalizacije sistemskih bolezni vezivnega tkiva: lupusom kože, sklepov pri revmatoidnem artritisu. Obstajajo dokazi o spremembi vrst kolagena v smislu patologije (Serov VV, 1981)
Ugotovljeno je bilo, da neonatalno je na koži človeških zarodkov prevladuje kolagena tipa III 30%, nato nadomestijo predvsem kolagena tipa I (Epstein E. N. in sod., 1975). Granulat tkiva pri odraslih tudi prvi prevladuje kolagen tipa II, pri čemer zamenja zorenja v kolagena tipa I. V tem primeru, keloidi, ki je označena z nezrelih celičnih elementov ostaja visoka vsebnost kolagena tipa III. Treba je omeniti tudi, da kopičenje kolagena v revmatoidnega artritisa, skleroderma, različne kroničnega vnetja, pljučne fibroze, jetrne ciroze (Wick G. et al., 1978).
Sistemska sklerodermija je značilno fibroze kože in notranjih organov, ki je razložen z rastjo vezivnega tkiva. Tako se je po de Crombrugghe B. et al., 1990 opaziti povečanje vsebnosti kolagena v tipe kože I in III. . Perlish J. S, et al, 1988, omeniti, da je razmerje med kolagenske tipe I in II, značilne za zdravo kožo ni razpadla v skleroderma, ampak spreminja svoj porazdelitev: vsebnost kolagena tipa III je v srednje in globoke plasti poveča, in kolagen I tip samo v globlje plasti usnjice (Majewski S. et al., 1992). V prekata miokarda bolnikov z sistemska skleroderma pokazala povečana vsebnost kolagena tipa 1 pri 41% (Chapman D. et al., 1990), sintezo kolagena tipa I povišan tudi v labialnih žlez tkiva žlez pri bolnikih s sistemsko sklerozo (Janin A. et al., 1990) .
V sistemski lupus eritematozus, ki ga spremlja kožnih lezij pokazala razdrobljenost kolagena, zlasti del bazalne membrane.

Spreminjanje razmerja tipov I in kolagen II najdemo tudi v aterosklerotičnega plaka, s osteogenesis imperfecta, osteoartritis in nekaterih drugih bolezni. Zarodka hrustanec sintetiziramo vrste I in kolagen II in tipa odraslih I kolagena ostane le v perichondrium v ​​kostnem tkivu pride do obratnega procesa (Seyer J.M., Vinson W, S., 1974).
Vprašanje spreminjanja mehanizme sinteze kolagena še ni v celoti rešeno. Obstajata dve možnosti: sprememba v kvantitativnem vsebino tkiva populacij celic, ki proizvajajo določene vrste kolagena in / ali preklopni sintezo v celicah med diferenciacije skozi zatiranje ali depresija ustrezno gensko regulatornih faktorjev (IAPM R. et al, 1976, 1977.). Pri sistemski razmerju lupusom giblje med celično in medcelične snovi v prid slednje (Majewski S. et al., 1992), kar kaže, da je povečanje sinteze kolagena z fibroblastih. Taka hipersekrecije je posledica povečane ekspresije gena kolagena. Obstajajo dokazi povečanja ekspresije gena kolagena tipa I pri bolnikih z lupusom kožo 3-krat v primerjavi s kontrolno skupino (Herrman N. in sod ,, 1991- Varga, J. et al., 1990). Herrman H. et al., 1991, kažejo ugodne spremembe v nivoju gena tipa kolagen I v sistemske skleroze.
Zgodnje študije kolagena kot antigen uporabi netopni kolagen stekel k sodbi da kolagen in želatina (denaturiran kolagen) niso antigeni. V poskusih z kunce z imunizacijo s kislinsko-topen kolagen, pridobljenega iz kit kuncev, je bilo dokazano, da je topen kolagen imunogenost in inducira imunski odziv s tvorbo specifičnih protiteles (Rothbard S. in sod., 1965). V nadaljnjih raziskavah se je izkazalo, da je kolagen v formulaciji reagira s protitelesi, na kolagen in protitelesa prisotna v serumu pacientov z revmatoidnim artritisom (Steffen, S., 1980).
V literaturi je opisano imunogenost šibke kisline, topnega in denaturiranega kolagena s protitelesi za kolagen s strogo generičnega specifičnosti in visoko stopnjo občutljivosti medvrstnega za človeško vretenčarjih (Timpl R. et al., 1968).
Imunološke raziskave so pokazale, da je prisotnost kolagenskih molekul treh različnih skupin antigenske determinante (Timpl R., 1976). Miška se protitelesa proti govejemu tipa kolagena I reagira z determinantami v terciarnem vijačni regiji, tj s strukturo odvisnega spenjanje verig [alfa 1 {|), 2 alfa]. Rabbit protitelesa za nativni tip kolagena I reagira z različnimi vrstami dejavnikov na končnih področjih verig (Lindsley N. in sod., 1971). Rat protitelo tipa kolagena I reagira z determinantami o supercoiling in ne reagirajo z izoliranim alfa verige (Hahn F. et al., 1974). To je bilo, da je proces tvorbe protiteles v odgovor na kolagen thimic neodvisen (Selam. Et al., 1972).
Kolagen je avtoantigen. Dokaz za to so številni poskusi s kolagenom povzroča artritis. Pri 28% miši po dajanju kolagen tipa II homologno razvil artritis klinično in histološko podobno revmatoidnega artritisa pri ljudeh, so tudi pogosto zazna krvnega revmatoidni faktor, protijedrna protitelesa in protitelesa za tip kolagen II (Bouvetov G.-P. sod ,, 1990). Obstajajo poročila razvoj avtoimunskega artritisa pri kuncih kot odziv na avtologne kolagena tipa II (Trentham D. F. et al., 1978). V poskusih z uporabo kolagen tipa II, artritisa smo uporabili za idduktsii kolagena obdelamo s pepsinom in zato predlaga, da antigenske determinante, odgovorne za imunski odziv, razporejena v območju terminala in se sprosti pod vplivom kolagenaze v nativni kolagen (Steffen S. , 1980).
Kolagen fibrile pri fizioloških pogojih (nevtralen pH, temperatura pod 37 ° C) obstojnost pri exopeptidases (tripsin, pepsin, papain) in celične lizosomski nelizosomalnyh in endopeptidases zmožna uničiti le denaturiranega kolagena (Weiss J. V., 1976). Za dolgo časa nismo mogli najti posebne collagenolytic encime v telesu. Trenutno collagenolytic encimi izoliramo iz mnogih tkivih: kože, hrustanca, roženico, dlesni, sinovialni ovojnici, želodca, ledvic, maternice, jeter. Nahajajo se v epitelijskih celicah jeter, dlesni in povrhnjice, ampak predvsem v mezenhimskih celic: polimorfonuklearnih levkocitov, eozinofilcev, makrofagov, fibroblastov, osteoblastov, sinoviocitov. Kolagenaze je tudi v trombocitov (Harpes E. s sod., 1975). Kollagnoliticheskaya aktivnost v patoloških pogojih poveča: v tumorjih, celjenje ran, vnetij. Kollagneaznaya aktivnosti je navedeno v sinovialni tekočini, pridobljenega iz kolenskih sklepih bolnikov z revmatoidnim artritisom. Tako sinovialna kolagenaze proizvajajo celice sinovialni ovojnici in kolagenaze, ki se sprošča iz garnulotsitov sinovialne tekočine, lahko odgovorna za izdelavo imunogenega kolagena. Kolagenaze uvedemo v votlino spoja zajec kolena, povzroči razvoj artritisa (Steffen S. et al., 1979).
V skleroderma odkrile nezadostno collagenolysis, kar lahko vodi k fibrozi ni manjša od povečane sinteze kolagena (Peresom-Tamajo R., 1978).
Veliko število del, namenjenih urejanju collagenolysis. Ugotovljeno, da kolagenaze se proizvaja v obliki neaktivnih zimogeni (prokollagenazy), ki je označen s tem, "presežek" peptid. Encim aktiviranje poteka z omejeno proteolizo, tj cepitev molekule pod vplivom lizosomalnih encimov ali nevtralnih peptidaze. Poleg tega je bilo ugotovljeno, da je aktivnost kolagenaze inhibirana v bližini serumu dejavnikov, med katerimi je glavno vlogo igrala alfa-2-makroglobulina. Collagenolysis urejeno, očitno kombinacijo naslednjih treh mehanizmov: stimulacijo sinteze kolagenaze v celicah hormonov, prostaglandinov, faktorji, ki jih mastociti, limfocitov, aktivacijskih epiteliem- prokollagenazy- inhibicijo kolagenaze aktivnosti (Bruto J., 1977) sintetizirane.
Ima specifičnost substrat kolagenaze. Občutljivost na kolagena tipa I kolagenaze iz vseh virov je 5-krat višja od tipa II kolagena. Kolagenaze polimorfi precej višja (15-krat) deluje na kolagena tipa I kot tipa III kolagena in kolagenaze v fibroblastov in makrofagov selektivnost odsoten (Weiss J. V., 1976). Ti podatki kažejo, da lahko ne samo sinteza, ampak tudi proteoliza kolagena v različnih celicah pomembno vlogo pri regulaciji tipične sestave kolagena v vnetje in fibroza razvoj.
Kolagen je domen na frakcijo komplementa CLQ. Pod vplivom kolagenaze o sinovialne membrane pri revmatoidnem artritisu, so kolagenske molekule uniči mesto, odgovorne za vezavo komplementa CLQ (Mensel E. J. et al&bdquo- 1978).
Vloga kolagenaze in protiteles na kolagen v razpršenih bolezni vezivnega tkiva slabo razumemo. Največje število študij, namenjenih za zdravljenje revmatoidnega artritisa. V poskusu s vnosu votlino zajec kolena spoji kolagenaze artritisa v 18 urah po injekciji. V kulturi revmatoidnega sklepna prokollagenazy tkiva označena aktiviranje granulocitov. prokollagenazy aktivnost pri revmatoidnem sinovialni tekočini (Okada Y., 1990) se je povečala.
Tako lahko aktiviranje kolagenaze v kolenskega sklepa votlini služi kot eden od vzrokov za sproščanje imunogenega kolagena, ki lahko povzročijo nastanek avtoprotiteles. Veliko število študij namenjenih identifikaciji avtoprotiteles na kolagen v serumu pacientov z revmatoidnim artritisom. Te študije se nanašajo na protitelesa na kolagena tipa II.
Protitelesa proti kolagena tipa II pri bolnikih z revmatoidnim artritisom najdemo v velikem odstotku primerov kot pri zdravih kontrolah (Fujii K. et al., 1992- Boisser M. S. et al ,, 1991). Z encimskim imunotestom in 22,7% bolnikov z revmatoidnim artritisom so ugotovili protitelesa z nativno tip II kolagen, in imajo občutljivost za prečkanje kolagenov tipa I in III. Po Jeng K. S. et al., 1990, protitelesa tip II kolagen so ugotovili pri 19% bolnikov z revmatoidnim artritisom,
Znatno manj literaturnimi podatki o ravni protiteles proti vrsti kolagena I pri bolnikih z revmatoidnim artritisom, kot posledica, je delo, ki naj preuči ta parameter. Raven protiteles proti tipa kolagen I, definirana pri bolnikih z revmatoidnim artritisom je znatno višja kot v kontrolni skupini (p<0,005). Как видно из табл. 1, титр антител к коллагену I типа увеличивается с возрастанием степени активности процесса (М. X. Таова). При этом уже в группе с минимальной степенью активности он превышает нормальные показатели (р<0,05). Титры антител к коллагену I типа достоверно различаются между собой в группах с различной степенью активности ревматоидного процесса (р<0,05) (рис.1). Выявлена линейная корреляционная зависимость между степенью активности ревматоидного артрита и титром антител к коллагену I типа (г=+0,69- р<0,001), что позволяет говорить о важной их роли в патогенезе ревматоидного артрита.
Ralky L. G. in sod .... 1991 pokazala zvišane ravni protiteles na kolagen tipa I pri miših s spontano artritisom. Dejstvo, da je pri bolnikih z juvenilnim kroničnim artritisom in revmatoidnim artritisom povečala titre protiteles s tipom kolagena I v primerjavi z titer protiteles in kolagena tipa II in III ugotavlja Svobodora J. et al .... 1989.

Protitelesa na kolagen v drugih razpršenih bolezni vezivnega tkiva, čeprav redki podatki iz literature in nedosledno, protitelesa proti kolagena voljo v bazalne membrane kože pri dermalni bulozni obliki sistemskega lupus erythematosus (Woodley R. T. in sod., 1991). Protitelesa kkollagenu vrste I in II označene pri 35% bolnikov z lupus eritematozus MORELAND I. W.
Tabela T. Ravni protiteles proti tipa kolagena (AT K1) skupaj (OFNP) in imunoreaktivnega plazmi fibronektina (AFNP) pri bolnikih z revmatoidnim artritisom z različnimi stopnjami aktivnosti

I - skupina bolnikov z revmatoidnim artritisom z 1 stopinje aktivnosti- 2 - Skupina bolnikov s stopnjo aktivnosti- 3 - 1. skupina bolnikov s stopnjo aktivnosti.
* p<0,005- **р<0,05.
V literaturi je le malo dokazov o ravni protiteles na kolagen tipa I pri bolnikih s sistemski lupus eritematozus. Resnost klinične manifestacije razlikujejo na različnih stopnjah aktivnosti bolezni. Razumljivo je predpostaviti, da je raven protiteles proti tipa kolagena Prav tako se razlikuje pri različnih stopnjah delovanja. Titer protiteles za tip kolagen I, avtorji te objave je definirano pri bolnikih s sistemski lupus eritematozus, je 1,12 ± 0,19. V kontrolni skupini glede na indeks 0,60 0,03. Razlika med titer protiteles proti kolagena tipa I pri bolnikih s sistemskim eritematoznim lupusom je bistveno višja kot v kontrolni skupini (p<0,01) (табл. 2).
Tabela 2. Ravni protiteles proti tipa kolagena I (AT K1), skupna (OFNP) in negativni fibronehina plazmi (AFNP) pri bolnikih s sistemski eritematozni lupus, sistemska skleroderma in revmatoidnega artritisa in pri zdravih

+r<0,001- **р<0,025- ***р<0,05.
V ravnem študija protiteles na kolagen tipa I pri skupinah bolnikov z sistemski lupus eritematozus z različnimi stopnjami delovanja procesa je pokazala, da je v skupini z najmanjšo stopnjo aktivnosti na kolagen ravni protiteles ni presegla nivo predhodno določenega v kontrolni skupini (p>0,05). Vendar pa se s povečanjem stopnje aktivnosti lupus titer protiteles zvišanja kolagena tipa I. Pri skupinah z zmerno do visoko stopnjo aktivnosti figura znatno nad običajnim nivojem (p<0,025) (рис. 2).
V sistemska skleroderma Rowley M.J. s sod. (1987) poročajo povečane nivoje protiteles proti kolagena tipa 1, medtem ko Mackil A. M. et al)., 1982, poročajo nizko raven protiteles proti tipa kolagena I iz te skupine pacientov.

RBS. 2 nivoja aitntel tipa kolagena I pri bolnikih s sistemskim eritematoznim rob z vsaj (1 c.) Utorennoy (2 c) in visoka (t 3) stopnja aktivnosti
Protitelesa proti kolagenov tipa I in III so bile ugotovljene pri 75% bolnikov z lokaliziranim sklerodermo (Samsonov V. A. et al., 1990), v 70% protiteles proti denaturiranega kolagena (želatinsko) (Suchkova TN et al., 1989) .
Dvoumnosti presoje o ravni protiteles proti vrste kolagena, ki je osnova za medceličnem matrike kože in je zato bolj pogosto prizadeto sistemsko sklerozo, nas je spodbudilo, da izvedejo obsežno študijo. Določene s povprečno stopnjo protiteles proti vrsti kolagena I pri bolnikih s sistemsko sklerozo znatno presegla iz kontrolne skupine zdravih darovalcev (p<0,0025).

Pri vseh bolnikih s sistemsko sklerozo smo razdelili v tri skupine, odvisno od stopnje aktivnosti bolezni. Raven protiteles proti tipa kolagen I, definirana v teh skupinah imel naslednji vzorec: s povečanjem stopnje aktivnosti se je povečala, medtem ko je bila v vseh treh skupinah bistveno višja kot v kontrolni skupini (slika 3). Obstajal je pozitiven značilna korelacija med stopnjo protiteles za tip kolagen I in stopnjo sistemskega delovanja lupusom (r = p + 0,59-<0,025).
Ko je nivo protiteles za preučevanje vrste kolagena I v skupinah bolnikov s primarnimi in generalizirane sistemskih stopnjah skleroderma terminal je pokazala, da je največja v skupini generalizirane faze in znatno višje vrednosti protiteles na kolagen tipa I v skupinah s primarno in končno odpovedjo skleroderma (p<0,025) (рис. 4).
Titer protiteles v vrsto kolagena I smo določili pri bolnikih z sistemska skleroderma z različnimi kliničnih sindromov: skupina s bazalni pljučna fibroza, in Sjogrenov sindrom CREST sindroma (tabela 3). Glede na prejete informacije, njegova največja raven odkrili pri bolnikih z Sjogrenov sindrom, presega vrednosti, pri bolnikih s CREST-sindromom in pljučna fibroza bazalno (p<0,025). Наименьший уровень антител к коллагену 1 типа выявлен у больных с CREST- синдромом.
Tako, ko je več difuzni bolezni vezivnega tkiva zazna povišane vrednosti protiteles proti kolagenov različnih vrst, vendar pa je njihova vloga pri patogenezi te bolezni ni jasna. Vendar pa nabrali podatki kažejo patogene protitelesa proti kolagena. Sklepna tekočina, pridobljen iz spoja z revmatoidnim artritisom, označene protitelesa na kolagen. Z metodo pasivne hemaglutinacije in z imunofluorescenco bilo ugotovljeno, da pri bolnikih z revmatoidnim artritisom, titer protiteles na kolagen v sinovialni tekočini kot v serumu (Mensel J. et al., 1978), kar kaže, da lokalno proizvodnjo imunogenega kolagena.
Tabela 3. količine protiteles v vrsto kolagena I (AT KI), skupna (OFNP) in imunoreaktivnega plazmi fibronektin (AFNP) pri bolnikih s sistemsko sklerozo, Sjogrenov sindrom, bazalni pljučno fibrozo in CREST-sindroma

Sinovialni ovojnici sklepov z revmatoidnim artritisom, z imunofluorescenco pokazala kolagenske-protitelo komplekse na kolagen. Uvod v votlino kolena zdravih kuncev kompleksi, pripravljenimi vitro protitelesa inducirane proliferacije artritisa kolagena kolagena (Steffen S. in sod., 1980).
Kljub mnenju nekaterih avtorjev (Mackel AM et al., 1982) o manjši vlogi protiteles kolagena v patogenezi razpršenih bolezni vezivnega tkiva, se zdi bolj razumno presojo na pomembno vlogo protiteles
kolagen, vendar je njihova vloga v patogenezi teh bolezni je nejasna. Ali tvorba avtoprotiteles na kolagen sprožitev poškodbe navor tkiva ali nastajanje sekundarnih imunskih kompleksov in je posledica uničenja in sproščanje imunogenega kolagena tkiva - neznano.