Medicinski in genetske raziskovalne metode - Pediatrična nevrologija

Video: V-ti nacionalni javni nagrada na področju redkih bolezni "Blue Bird"

Dedne bolezni živčnega sistema je pomembno, da se jih loči od phenocopies ki jih predstavljajo eksogene škodljivimi dejavniki. Genetski raziskovalne metode omogočajo, da se potrdi ali zavrne dedno naravo bolezni, določi izvajanje terapevtskih posegov. Poleg posebnih genetskih metod raziskovanja (študiji genealoških tabel, twin, citogenetičnem, biokemijske metode raziskovanja), o ustanovitvi diagnozo dednih bolezni, za pomoč pri kliničnih raziskav (zlasti identifikacija dizembriogeneticheskih brazde) in nekaj paraclinical metode. Torej, imajo Elektroencefalografija hkrati bolnih otrok in zdrave starše in sorodnike, v nekaterih primerih prispeva k vzpostavitvi dednega narave sindroma epileptoformnih. Vodenje klasično elektro, chronaximetry, lahko elektromiografija pomoč pri diferencialni diagnostiki dednih bolezni in njihovih phenocopies.

Priprava in klinično-genetska analiza genealoških tabel.

Video: Petrova NN Navodila za genetske študije shizofrenije

Priprava genealoških tabel je pomemben način za učenje bolnikov z dednimi boleznimi živčnega sistema.

Sl. 72. Simboli pri urejanju rodbinska drevesa.
1 - POL 2 ženski - moški POL 3 - bolnye- 4 - suprugi- 5 - nezakonski komuniciranja-6 - dvakrat zhenatyy- 7-8 otroci - monozygotic bliznetsy- 9-10 dizygotic bliznetsy- - interseks- 11 - tla niso vyyasnen- 12 - otroka urodstvami- 13 - bolnik z neuspel obliki zabolevaniya- 14-15 proband- - fenotipsko zdrav prenašalec recesivna priznaka- 16 - domnevno recesivni prevoznika priznaka- 17 - nepreverjena podatki anomalii- 18 - umrl zgodaj detstve- 19 - je umrl v starosti 20 years- - spontani splav, mertvorozhdennyy- 21 - identifikacijske črke

Za simbol bolnikov, njihovih sorodnikov, prednikov in potomcev s simboli. Moški predstavljajo kvadratki, ženske - krogov. Mož in žena - kvadrat in krog, povezan z vodoravno črto. S to premica, ki je pravokotna na vezno linijo usmerjena navzdol za otroke, so znaki, ki razvrsti po starosti: starejši po levi, spodaj desno. Označb sorodniki so nameščeni na isti vodoravni liniji, ker spadajo v isto generacijo (sl. 72).
Bolezni opozoriti konvencionalni znak ali začetno črko imena bolezni. Posebne oznake so na voljo za smrti snemanje otrok, mrtvorojenih, spontanih splavov in medicinske in tako naprej. D.
Analiza pripravljene genealoške preglednice omogočajo dedovanje bolezni ali lastnost. Da bi ugotovili vrsto dediščine je včasih ključnega pomena pri diagnostiki nekaterih bolezni s podobnimi kliničnimi simptomi, pomaga določiti prognozo in terapevtske strategije.

Sl. 73. genotipske in fenotipske razlike v različnih vrstah dediščine
A. genotipske in fenotipske variante z avtosomnem prevladujočim (1) in avtosomno recesivno (2) tipa dediščine. Rdeča označuje mutirani gen, z velikimi tiskanimi črkami - dominantni alel. Rdeči trg - nenormalne fenotipa.
B. genotipske in fenotipske variacije zaporedoma ukvarjajo s kromosomu X (recesivne mutacije v kromosomu X). Rdeča pomeni X-kromosom z mutiranim genom. Rdeči trg - nenormalne fenotipa.

Video: Posvetovalni - diagnostični center "Zakonska zveza in družina"

Ponovitev bolezni v vsaki generaciji, ko se starši bolnega otroka, rojenega z isto boleznijo, najpogosteje se nanaša na prevladujoči vzorec dedovanja. Ko recesiven tip dedovanja bolezni se ponavadi pojavlja pri otrocih, ki so se rodili zdravi starši, s podobno boleznijo je včasih mogoče zaznati med sorodniki krilih (Cousins, strici, tete, nečake).
Nekatere bolezni se prenašajo z recesivne način očesi z X-kromosoma.
Prevladujoč in recesiven način dediščine opredeljujejo prevladujoči ali recesiven gen, ki določa funkcijo ali bolezni.
Kot je znano, je otrok polovica njegovih 46 kromosomov od matere dobi polovico - od svojega očeta. Vsak gen v mater kromosoma 23 ima alelov t. E. Nekaj, seznanjene gen na kromosomu 23, je prejel od svojega očeta. Normalno delovanje lahko zagotovi prisotnost še enega od alelne gene. V primeru mutacije enega od alelov gena (recesivna) druge (prevladujočim) gena, ki je v celoti ali skoraj v celoti nadomestili Nogo funkcijo mutant. Zato je klinična manifestacija recesivna genske mutacije je mogoče le, če pride do enake mutacije v dveh alelne gene, uvedenih v genotipa otroka in očeta in matere (sl. 73).
V avtosomno recesivno dediščino tipa dva mora bolan otrok staršev enega od dveh recesivnih mutiranih alelov (heterozigotno stanje). Starši s skoraj zdrava. vsak od staršev polovico gamet bo nosijo mutirani gen, pol - ni mutiral. Ob sotočju gamet so štiri možnosti: a) obe geni so mutirani - je otrok bolan (homozigotno) - b) oba gena divjega tipa - otroka zdorov- c) mutant gen mati plus gen ni mutiral oče - otrok je v dobrem zdravstvenem stanju, vendar je heterozigotna nositelem- g ) oče mutant gen plus nemutirani gen matere - enak rezultat kot v prejšnji različici. Kot rezultat, ko so avtosomno recesivna tip dedovanje 25% otrok bolan in zdrav 25% 50% (25% + 25%), kot je zdrava, vendar so heterozigotnih nosilci mutirane gena, kot tudi njihovi starši. Ti odnosi so pokazala šele, ko je veliko število otrok v družini.
Recesivni geni, ki se nahajajo v avtosom lahko psevdodominantny določiti način dedovanja, ki se upoštevajo v primeru, ko je eden od staršev -, torej ima heterozigotno nosilec in drugo slabo mutacijo obeh alelov ... Vsak gamete bolan od staršev ima mutiran gen. Zato je 50% verjetnost, da bo rojstvo bolnega otroka, 50% - klinično zdrave heterozigotnih nosilcev. Bolezen v generacij ponovitev ustvarja lažen videz dominantnem dedovanju.

Sl. 74. genotipski nihanja spol kromosoma nondisjunction

Tabela genotipske variante v normalnem in spolnega kromosoma nondisjunction. Spolna kromatin v zdravstvenem in spol kromosoma nondisjunction (sheme).
Recesivna mutantni gen, ki se nahaja v ženskih spolnih kromosoma povzroči recesivno dedovanje, vezano na kromosom X (sl. 74). Ženske na splošno, ne zboli, saj če imajo mutiran gen v eni X-kromosoma drugega X kromosoma, s gen alelov divjega tipa zagotavlja ohranjanje normalnih funkcij. Ženska je torej heterozigotna nosilec polovica zarodnih celic bo imel kromosomu X z mutiranim genom. Na srečanju s spermo, ki nosi kromosom X, bo kot gamete vodijo k razvoju ženskega telesa - heterozigotnega prevoznika. Ko jo je srečanje s spermo, ki nosi Y kromosom, se rodi bolan fant, kot je njegov Y kromosom ne gen alelna mutant gen kromosoma X. Ko poročene bolniki moški, kot so hemofilija, zdravje žensk vsi fantje v njegovi družini rodil zdrav, saj dobimo iz očeta pacientov, "zdrav" Y kromosoma in dekleta - heterozigotnih prevoznikov ( "vodniki").
Ko se bo zakon zdrav moški z žensko "vodnika" dečkov rodi bolan samo v polovici primerov, bodo dekleta lahko heterozigotnih prevozniki so tudi le polovico primerov.
Prevladujoči dedovanje pojavi, ko prevlado mutant gena. Heterozigotna prevladujoči mutant gen ima klinične posledice. Ko bolnik z zdravim poroka partnerski polovica otrok prejela prevladujoč mutirani gen in bolne, drugo polovico zdravje otrok. Opozoriti je treba, da imajo dominanten gen lahko drugačen proyavlyaemostyu, penetrantnih. Penetrantnih s številom bolnikov s skupnim številom otrok, ki so prejeli mutiran gen (v odstotkih) določena.
Poznavanje živčnega sistema zakonov dedovanja in vrsto dedovanja bolezni je mogoče napovedati verjetnost rojstva bolnega otroka, napovedujejo potomcev. To delo temelji na medicinskem in genetskega svetovanja.
Pomembno je, da se spomnite, pa je, da prisotnost ponavljajočih se bolezni v rodovniku ne dokaže svoje dedne narave. Obstajajo primeri, ko je ponovni pojav družine iste bolezni, povezane s trajno vpliva na vse družinske člane vseh zunanjih dejavnikov (na primer, primere epilepsije pri sorodnikih, okuženih z Echinococcus, s intracerebralne ciste).
Različne dedne bolezni živčnega sistema se lahko razlikujejo od funkcij tip dedovanja. Na primer, Lou Gehrigova bolezen - Marie dedna prevladujoči tip, Duchennova miopatijo prenaša prek mrežnimi recesivna tip-X povezani. živčni sistem dedna bolezen včasih drugačno vyrazhennost- skupaj z obsežnimi klinično sliko opazovanega neuspela izbrisani obliki. To je lahko zaradi neenake genov ekspresivnosti v različnih genotipov in brez enotnih pogojev za obstoj posameznega organizma. Zato je pri analizi rodovnike pomembno upoštevati relativno z mehkimi znaki bolezni. Včasih ustrezno pripravo genealoških tabel je možno šele po temeljitem pregledu (klinični in paraclinical) bolnikovih sorodnikov.
Velik pomen je vezan twin metode, ki temeljijo na dejstvu, da so monozygotic dvojčki bolj EW za dedne bolezni, kot dizygotic. Enojnima metoda se uporablja le za diagnosticiranje in prognozo bolezni v enem od dvojčkov, temveč tudi za določitev vlogo genetskih faktorjev v patogenezi bolezni živčnega sistema (s primerjavo skladnostne mono- in dizygotic dvojnih parov).
Dermatoglyphics - študija vzorec kože natisne v dlani in stopal. Če obstajajo individualne razlike v prstnih odtisov zaradi posebnosti razvoja posameznika, obstaja več glavne vrste njih. Značilne spremembe prstnih odtisov in vzorcev palmovih so označene s številom dednih degenerativnih bolezni živčevja. Za Downovim sindromom, označen s prečno (tetradigitate) brazde predstavlja črto, ki se razteza čez dlani v prečni smeri. Spreminjanje kota ATD: večino bolnikov z Downovim sindromom kotom več kot 57 °. Podobne lastnosti je mogoče opaziti pri sorodnikih pacientov. Mezinec namesto dveh prečnih gub, ena označen krat.

Sl. 75. normalnim kariotipom moški (A) in ženski (B).
Dermatoglyphics uporabljajo tudi za vzpostavitev mono- ali dizygotic dvojčka.
Karyological metode raziskovanja vključujejo študijo kromosomov (kariotip) in medfaznih jedra somatskih celic.
Študija kromosomov navadno temeljijo na materialne kulture limfocitih periferne krvi. Študija o kariotip je mogoča samo na metafaze celične delitve. Vendar pa normalne celice ne razdeli, tako da se kri kultiviranje mitogeni uporablja za spodbujanje delitve zdravila (na primer, phytohemagglutinin). Za kopičenja celic v metafaze tem koraku uporabimo blokatorjev (kolhicinom in drugi.).
Analiza je bila izvedena na kromosomih glede na njihovo velikost in obliko, kot tudi detektirati s posebnimi metodami obarvanje vzdolžni diferenciacijo kromosomov. Za opis kariotip so posebej izdelani simboli (Pariz nomenklaturo).
Kariotipa anomalije lahko razdelimo v dve glavni skupini: motnje številom kromosomov (anevploidija) in motnje v strukturi posameznih kromosomov (obnova).
V normalni človeški kariotip, v kateri so 22 parov autosomes in spolnih kromosomov par - dva X kromosomi pri ženskah in eden kromosom X in Y kromosoma pri moških (slika 75). V času nastanka gamet, vsak od njih dobi 22 autosomes in en spolni kromosom
soma. Združitev gamet obnavlja normalno diploidnih niz kromosomov. Kot posledica kršitve kromosomov v genezi gameto- oblikovana neuravnoteženim kromosomske sklope, v katerih je dodatno kromosom ali manjka kromosom. To vodi k razvoju ustreznih sindromov ali celo nezdružljive z življenjem.
Ko se kromosomske preureditve spreminjanje količine genetskega materiala, ki povzroča razvoj različnih kromosomskih sindromov (trenutno so opisani okoli 40). Med motenj razlikovati normalno kromosomsko strukturo delecije, podvajanje, insercije translokacije, inverzije in podobno. D.
Izbris kromosoma regiji imenuje izgubo. Običajno je to posledica vrzeli v kraku kromosoma z izgubo distalnega odseka. Primer sindroma izbris je sindrom mačka jok.
Inverzije in prenosi so posledica dveh odmorov kromosomskih. Obrat - sprememba v zaporedju kromosomskih mest - tvorjen z obema vrzeli v enem kromosomu in vrtilni del nameščen med dvema točkama diskontinuitet 180 °. Ne vsebuje centromerov Srednji odsek se lahko izgubijo, kar ima za posledico tvorbo intersticijskih delecij. Izvajanje obeh prelomov v dveh različnih kromosomov je lahko povezana s kromosomsko translokacij straneh. Kot inverzijo, in prenos ne povzroči izgubo ali dobiček genskega materiala, in zato imajo le malo vpliva na fenotip nosilnih prerazporeditve. Vendar pa prisotnost teh sprememb staršev pogosto povzroča otrokom neuravnotežene kromosomske nize (z brisanjem in podvajanj - podvojitev posameznih odsekih kromosoma). In približno polovica odkritih primerov kromosomskih nepravilnosti je posledica kromosomske preureditve staršev.
kromosomskih nepravilnosti ni mogoče podedoval, vendar pa se lahko pojavi kadarkoli embriogeneze. V tem primeru je bilo ugotovljeno, le v nekaterih celicah (Mozaicizem).
Seks kromatin v nasprotju s preučevanjem kromosomov v medfaznih jedra somatskih celic, ki ne zahtevajo njihovo predhodno gojenje. Razlikovati X sex kromatin (Barr telesu) Y-sex kromatin.
X spol kromatina je inaktiviran X-kromosoma. Ne glede na število X kromosomov v celici aktivno deluje le eden od njih, medtem ko je ostalo kondenzira v Barr telo - mala gosto obarvanih kepe, ki se nahajajo v bližini jedrske membrano. V primeru kršitve kromosoma X. število Barr celice spreminja, vendar je največje število ena manjše od števila razpoložljivih v kromosomih mobilnega X. Zato je v normalnih moških tele skoraj ni mogoče zaznati, in ženske v nekaterih celicah (odvisno od vrste tkiva in fizioloških značilnosti organizma) dokazuje enojno Barr telo.
Ko obarvanja medfaznih jeder nekaterih fluorokromi (npr, kinakrin in njegovih številnih derivatov) je mogoče odkriti
Y-sex kromatin - svetlo sijoča ​​mesto v jedru. Odvisno od vrste tkiva in fizioloških značilnosti organizma pogostosti Y-kromatina zaznavanje spreminja nekoliko, vendar je največje število vložkov enako številu Y kromosomov (0 - ženske 1 - pri moških 2 - ko sindroma XYY).
Ker je analiza spolnega kromatina enostavna in ne zahteva celične kulture (navadno analiziramo strganje lično sluznico epitelija), se ta metoda pogosto uporablja za hitro diagnozo osumljenih nenormalnosti spolnih kromosomov. Analiza kromosom je bolj delovno intenzivna, vam omogoča, da bi dobili veliko več informacij in je pomemben korak v diagnostiki različnih prirojenih in dednih sindromov.