Dodatek - Kriptosporidiozo in HIV

Video: Mednarodni dan boja proti okužbi s HIV in aidsa. Ryazan 2014/01/12. To je zanimivo.

I. se raziščejo kontingente:

1. Bolniki s sindromom dolgotrajno drisko.
2. Bolniki so nalezljive črevesne bolnišnice.
3. Bolniki z okužbo z virusom HIV z znaki črevesne disfunkcije.
4. Posamezniki so v stiku z bolnikom opomore od kriptosporidioza prej (rekonvalescente Šentvid pri Stični).

II. Preskusni materiali:

1. iztrebki bolnikov.
2. bruhanje.
3. izpljunka in izpirku (sum respiratorni Kriptosporidiozo).

V blatu so zbrani v čistem in suhem dobro zaprti-zabojnikov in transportiramo v laboratorij. Oociste v blatu so shranjeni za relativno dolgo. Če je predvideno dolgotrajno skladiščenje materiala, uporaba konzervansov (10% formalinom tekočine Barbagallo, 2,5% raztopina kalijevega dikromata). Konzervansa zmešamo z blatom v razmerju 2: 1 in mešamo dobro. Shranjujte v hladilniku pri + 4 ° C Oociste v 2,5% raztopine kalijevega dikromata ostanejo izvedljiva skozi vse leto.

V simptomatskih primerih kriptosporidioza v razmaza v blatu našli veliko število oocist. .. Pregled kontaktnih oseb in rekonvalescente Šentvid pri Stični, in sicer z znano nizke koncentracije oocist v blatu, so uporabljene tehnike obogatitve - flotacijo in sedimentacije.

III. Priprava in barvanje madeži blata:

Na prosojnici majhno količino blata odlagajo in enakomerno tanka plast brisa. Če je potrebno, se lahko pavšalni blata dodamo 1-2 kapljic fiziološke raztopine. Razmaz se posuši na zraku in fiksna v zmesi Nikiforov (mešanice enakih delov etra in etanola 96 °) za 10-15 minut in nato ponovno posušimo na zraku in obarvajo, nato podvržemo mikroskopijo.

I. karbonskega fuksina obarvanje Ziehl-Nielsen:

Pritrditev Pap hitro porabijo 3-5 krat nad plamenom gorilnika. Stain raztopina carbolfuchsin 5-20 minut. Sestava raztopine osnovno fuksina - 2 g, 96 ° etil spirt- 12 ml fenol - 5 ml destilirane vode - 100ml do (škrlatna raztopimo v alkoholu fenol vodo, nato združitev).

Izpiranje bris vodo iz pipe, obarvana, 7% (5-10%) raztopine žveplove kisline za 20-60 sekund. speremo z vodo in odtenek 5 minut s 5% vodnim malahitno zelenega in 10% etanola in 0,2% vodni raztopini metilen modrim. Sperite z vodo, temeljito posušimo na zraku in pregledamo pod mikroskopom s potapljanjem.

Rezultati. Cryptosporidium oociste so obarvani v različnih odtenkih svetlo rdeče barve in imajo obliko zaobljenih tvorb do 5 mikronov v premeru. Znotraj nekaj oocist lahko študiral podolgovate sporozoite. Podobni mikroflora je naslikana v zelenih odtenkih.

Opombe: Rdeča barva je lahko pobarvan s kapljico maščobe podobnih snovi in ​​biseri nanosi. Tudi naključna podobnost v velikosti, lahko te formacije se lahko razlikujejo od Cryptosporidium oocist z njihovo pomanjkanje izrazito membrane in nekaj strukturirano vsebino v notranjosti. V dvomljivih primerih je treba serijske madeži barve drugačen način. Če je potrebno, da se zmanjša koncentracija malahitzelene (izbrana empirično). Obarvanje Ziehl-Nielsen se lahko izvede brez predhodnega posnetka brisov.

Ta metoda se šteje, da je eden izmed najbolj informativne in zanesljiva za odkrivanje Cryptosporidium oocist.
Barva ne zbledi, za več mesecev.

2. barvanjem z safranina ga Kester.

Pap, zračno posušili, določen v zmesi Nikiforov, ponovno posušili pri sobni temperaturi, da se določi nad plamenom gorilnika. Barvilo raztopina Safranin 5 minut. (Vodna nasičena raztopina Safranin - 2 dela, 5,6% raztopina KOH - 5 delov). Po izpiranju z vodo za 10 sekund razlikovati. v 0,1% raztopine žveplove kisline v raztopino barvila voda in smolnatega pri 5% malahitno zelene (cm. zgoraj) za 10-15 sekund. Sperite z vodo, temeljito posušimo na zraku in pregledamo pod mikroskopom s potapljanjem.
Rezultati: Cryptosporidium oociste so pobarvane v bledo roza in tudi poudarjeno na zelenem ozadju. Drugi mikroorganizmi niso obarvali z safranina.
Opomba: Ta metoda se šteje, da je eden od najbolj natančna pri odkrivanju Cryptosporidium oocist, najočitneje omogoča videti notranje vsebino oocist (sporozopty). Slikarstvo nestabilne droge hitro zbledi in niso primerni za dolgotrajno skladiščenje.

3. Obarvanjem z modro-eozinom ki ga Romanovsky-Giemsa.

Ta razširjena krvni razmaz metoda obarvanje lahko uspešno uporabljajo v identifikacijo kriptosporody oocist na. V nekaterih primerih je zelo informativen, saj z ustrezno predhodno pripravo bris barvila prodre oociste in sporozoitov barve.

Pap, fiksni Nikiforov zmesi in temeljito zračno posušimo, hitro prevesti nad plamenom gorilnika (3-5 hitro akcijo). Madež 10% raztopine barvila iz 10 do 35-40 minut. Temeljito izperite v vodi (prednostno pod tekočo vodo), posušimo na zraku (je mogoče v curku hladnega zraka pod fen) in pod mikroskopom z vgrajenim sistemom potapljanjem.

Rezultati: Cryptosporidium oociste pa neobarvanega ali šibko obarvani tvorita zaokroženo formacije do 5 mikronov v premeru. Znotraj se nekatere oocist lahko proučili bledo modre podolgovati in rahlo ukrivljena telesa (sporozoitov) z rdečkasto granul notri. Sporozoiti se nahaja na obrobju oocist, tako da njen osrednji del prazna.

Opomba. Identifikacijske oociste težko zaradi dejstva, da druge črevesne mikroorganizmi obarvano tudi z modro-eozinom, in veliko bolj intenzivno oociste. V zvezi s tem je treba narediti tanke madežev, v katerem je uvedba mikroflore ni "pobeg" do zadnjega opazovalca. Painted izdelki ne zbledi že več mesecev, so primerni za dolgotrajno skladiščenje.

Video: Ljudje v Kazahstanu, je še vedno zelo malo znanja o prenosu virusa HIV