Izolacija klamidijo - Okužba s klamidijo v porodništva in ginekologije

Video: klamidijo simptomi pri ženskah

Izolacija klamidijo v celični kulturi

ločeno sečnice in materničnega vratu - Posebej izdelane blazinice se uporabljajo za zajemanje materiala. Material damo v epruveto s transportnega gojišča. Cevi in ​​medij, ki niso namenjeni za prevoz vzorcev lahko strupena za celice, in to lahko privede do lažno negativnih rezultatov. Prevozni medij lahko shranimo pri sobni temperaturi 1 dan pri 4 ° C -mesečno, pri -20 ° C - 4 mesece.

Gledano material je potrebno vzdrževati pri 4-6 ° C in v 24 urah do laboratorija, vzorec naslonil led. Študija zahteva ohranjanje žive klamidija, zato je pomembno, da se v skladu s temperaturo način dostave materiala.

Rabljeni McCoy celične linije, L-929, HeLa-920. pasaže celične linije običajno v roku 5-7 dni 3-4 dni spreminjajoče se okolje. Celice so bile odstranjene iz stekla z raztopino versene ali tripsina (0,02% in 0,25% v tem zaporedju). Gojenje enoplastna Celično suspenzijo na krovnih pripravimo 2,0x10 gostoto in ga vstavimo v ravnih ceveh, nameščene na dnu pokrova zdrsa. Lahko se uporablja za ta namen polimernih mikro plošče z ravnim dnom vrtin. Monoplasti tvorjen navzgor cevi pri 37 ° C 24 ur.

Po odstranitvi gojišča se kultivirane celice okužene z nalezljivo materiala od transportnega medija v volumnu 0,5 ml in centrifugirali v centrifugi s horizontalno rotorju pri 2500 obr. / Min za 1 uro. Nato inokulum odstranimo, cevi ali jamice izdelavo vzdrževalni medij 199 s 5% govejega seruma, ali fetalnega govejega seruma, 5% raztopino glukoze. 0,9-1,0 ug / ml cikloheksimid in antibiotiki (100 ug / ml gentamicina, 100 ug / ml, vankomicin in 25 mg / ml amfotericin B).

V je 48 ur po infekciji krovnih s monosloja odstrani iz epruvete, sušimo na zraku in fiksna v hladnem acetonu. Nadaljnji ukrepi v celoti skladni z zdravili za zdravljenje za neposredno imunofluorescenco.

Brskanje po izdelkih v fluorescenčni mikroskop omogoča prikaz svetlo zeleno klamidije znotrajceličnih mikrokolonije na oranžno ozadje citoplazmo.

Ko majhna količina osnovnih teles v materialu je izraz inkubacija okuženih kulture poveča na 3-5 dni v nekaterih primerih dobimo prehode r. E. okuži Sveže kulture tekoče faze in primarne kulture celic. Diagnostični laboratoriji redko uporabljajo prehode zaradi prevelikega zategovanja, da izda odgovor.

Postopek dodeljevanja C. trachomatis v celičnih kulturah je zelo občutljiva in specifična, vendar pa vam omogoča, da bi našli uspešne patogenov. Vendar pa ta metoda je 10-15% primerov lahko dajo lažno negativen odgovor.

Rezultat analize je podan v 5-7 dneh. Izvedbah odgovor izdajanje v kulturi diagnoze: "Metoda Kultura izpostavil C. trachomatis". "metoda kultura C. trachomatis ni dodeljena". "Študija spet zaradi citopatskega učinka".

Video: Klamidija okužbe pri ženskah