Virološki metode raziskovanja v nalezljivih bolezni

Virološki študije na kliniki za infekcijske bolezni, postaja vse bolj pomembna, kar je predvsem posledica povečanja deleža virusnih okužb, na kliniki, ki ni vedno značilno. Ob istem času, so hitre in zanesljive diagnostične metode virološki ni zasnovana za vse nalezljive bolezni, mnogi od njih delovno intenzivne, vodenje jih potrebujejo posebne pogoje, poskusne živali, gojišča in usposobljeno osebje. Trenutno diagnoza virusnih okužb z uporabo 3 glavne vrste raziskav.
1. Mikroskopska preiskava infekcijske snovi, da se zazna virusni antigen ali pathognomonic sprememb v tkivih. Za diagnostične namene, je neposredno mikroskopsko preiskavo bolnikov z okuženega materiala uporablja za omejeno število virusnih okužb (steklini, noric, rumeno mrzlico, herpes, itd). Širša uporaba metode je temeljila na odkrivanje virusnega antigena ob uporabi fluorescenčne protiteles. Metoda imunofluorescentni lahko velja le z jasno izpolnjevanje vseh tehničnih zahtev.
2. Virološke metod.
3. Serološki študije za določitev povečanja titra protiteles v dinamiki bolezni. Serološke metode raziskovanja so bolj dostopne v laboratoriju.
Za te študije je treba odvzem krvi v serumu med akutno boleznijo in med okrevanjem (sveže serum). Vzorce krvi za serološke teste se sprejme brez sterilne antikoagulanti in konzervansov.
Glavne faze virološke raziskave so izbor virusov in njihovo identifikacijo, opredelitev osnovnih bioloških lastnosti. Za izolacijo različnih skupin virusov trenutno ne obstaja ena sama tehnika. To je predvsem zaradi različnih njihovih lastnosti in značilnosti kulture izven gostitelja. Da bi raziskali biosubstrates rabo (sprane iz sluznice, krvi in ​​njegovih delov, cerebrospinalne tekočine, urina, blata, biopsijo organov in tkiv ali rezine, delo v obdukcije), ki jo podvržemo posebno obdelavo, čemur sledi prehod materiala. Gledano za raziskave materiala je treba shranjevati pri temperaturi od -20 ° C do -70 ° C. Glede na predhodne obdelave diagnosticiranje materiala ima svoje značilnosti, vendar v vsakem primeru Predpostavlja sprejel substrat maksimalno očistimo s sluz nečistoč celice organov in tkiv ali njihove fragmente bakterije. To se doseže s homogenizacijo materiala v posebnem aparatu ali trituriranjem v porcelanski malto z mrzlo kremenovega stekla (koščki organov in tkiv) z dodajanjem sterilno ohlajenega (+ 4 ° C) 0,9 %

Video: Najhujši virusi in bolezni v človeški zgodovini.

raztopino natrijevega klorida, da dobimo 10-30% suspenzije, čemur sledi centrifugiranje pri 1500-3000 vrt / min pri 10-15 min. Tako dobljeni Supernatant smo uporabili za nadaljnje raziskave.
Pred intenzivnega razvoja in uvajanja v načinu praksa kulture široko uporabljajo tkiva in celice, okužene poskusne živali ali chick zarodki. Te metode se uporabljajo v tem trenutku. Odkrivanje virusov z uporabo živali, najbolj primerne v primerih, ko je mogoče eksperimentalno reprodukcijo tipične vzorce nalezljivih bolezni ali nekaterih svojih pojavnih oblikah. Torej, lahko izvora in arbovirusi Coxsackie vozila mogoče odkriti po okuženju v sesajo miši možgane, influenca - ko okuženi chick zarodkov ali nazalno dajanje miših testnega materiala. V virologija laboratorijih v zadnjih letih pa je postal najbolj pogosto uporablja metoda celične kulture in tkiva, ki omogoča, da dodeli adenovirusi, herpes virusi, sincicijski virus dihal, miksovirusy in druge, že v prvih fazah raziskave za izvedbo vzročne diagnozo bolezni. Razlog za to so dobro raziskano citološke značilnosti interakcije večine virusov in celic. Tako okužba HeLa celice, HEP-2 material, ki vsebuje adenovirus tipa 2, že na dan 3 posledico spremembo značaja rasti monosloje celic in videza v obliki grozdnega grozdov tipične celice in T. G., dobro definirano v običajni svetlobni mikroskop z nizko povečavo.
Izjemen pomen za etiološko diagnozo nalezljivih bolezni ima izolacijo standardizacijo virusa iz testnega materiala, ki v tej fazi dela vključuje uporabo gensko čistih linearnih živali na podlagi njihove fenotipske (predvsem starostne) značilnosti. To je predvsem posledica dejstva, da so poskusne živali različnih genetskih linij in starosti, v različnem obsegu dovzetni za viruse. Torej, ko intracerebralno okužbo miši z virusom nevrotropni sev WSN influence pri živalih BALB / c linije, A, CBA in občutljivost mešanec je najvišji, istega vzorca s sedežem v primerih intranazalnem dajanju testne snovi. Bistvenega pomena za končne rezultate izolacije virusa je predhodni preizkus živali, oplojena jajca, celičnih kultur in tkiv za okužbo latentni virus. Zelo pogosto uporablja pri laboratorijski praksi piščančjih zarodkov lahko okuženi z virusi aviarne levkoze, ptičje encefalomielitis, nalezljiva sinusitisa, psitakoza, bolezni Newcastle patogeni nekaterih bakterijskih okužb (paratifus et al.), In Mycoplasma. Še natančneje bakterijske in virusne dejavnike lahko spontano inficiranje kulture celic in tkiv in v njej preživeti. Njihova prisotnost pomembno vplivajo na oceno materiala. Nekatere vrste mikoplazem v celični kulturi
lahko odgovorna za hemaglutinacije in gemadsorbtsiyu in tudi oblika plakov pod agarjem prevleke, tvorjen s podobnimi virusi. Prav tako je pomembno onesnaženje celičnih kultur istega tipa s strani drugih, da je najbolj pogosto povezana z HeLa celice in opazili pri delu z različnimi vrstami pridelkov v istem prostoru, s slabim ravnanjem z laboratorijsko steklovino in drugo. Prisotnost kontaminacije celičnih kultur ali inficiranih živali bakterijam, kot so splošno jasno razvidna (spremenljive narave rasti enoplastna celične lastnosti kulture medija, smrti piščančjih zarodkov ali živali s specifičnimi simptomi in t. d.) in posebno Težko udneny ni pri ovrednotenju rezultatov. Bolj zapleteno je vprašanje z latentno okužbo, ki zahteva uporabo serološke in druge metode. Te smernice je treba upoštevati pri delu zdravnika-virologa, zlasti za etiološke diagnozo obskurnih zadev.