Ultratom - osnova za histologijo

Video: požiralnik. Požiralnik. V svetlobnim mikroskopom.

Video: vranice. Vranica. Narežemo na elektronskim mikroskopom.

Ultratom (osnovni principi naprave in odseke)
Elektronskim mikroskopom tehnika študij bioloških predmetov od začetka sooča s težko pridobiti dovolj tanka (10-30 nm) odseke preučevanih predmetov. Na velikem debeline slike nekatere strukture, kot če "prekriva" na sliko drugih in njihovo učenje postane nemogoče.
Za rešitev te težave omogoča ultra-tanek oprema za rezanje. Za ta namen, z uporabo posebnih naprav - ultratome. najbolj pogosto uporablja ultratome Sumy rastlin in švedsko podjetje "LKB" v naši državi. Manj verjetno, da uporaba avstrijske naprave podjetja, "Reichardt" in Češkoslovaško enota "Tesla" (sl. 73).
Glavno načelo najsodobnejšimi ultratome je toplotni razteznostni kovinske palice, ki omogoča mikro predmet miruje in pritrjena na stekleno nožem.

Sl. 73.
Ultratom.
1 - železo stanina- 2 - razsvetljavo mikroskop- 3- 4 - izvajanje sterzhen- 5- mizo za stekla nozha- 6 - daljinski upravljalnik.

Priprava tankih odsekih ki sledijo nizu pripravljalnih postopkov:

Video: embriologijo. 1. Progenez. Začetno obdobje: gnojenje

1. Steklo nozhey- njihovih najbolj pogosto uporablja v elektronsko-mikroskopski laboratoriyah- nožev, izdelanih neposredno pred instrumenta ultratome "nozhedelatele" trakov steklenih določene stopnje;
2. priprava podporno sita za tankih prekatov - nanašanje filma z Formvar koordinatah, kolodija, ogljika;

3) Priprava ultratome. Ta korak se imenuje ostrenje enota: del predmeta se reši na ultratome na posebnem piramitome naprave oblikovane v štirioglati prisekane piramide (z vrhom ima trapezoidno obliko).
Sledi najpomembnejši trenutek - trenutek proizvodnjo prvi ultra-tanek kos objekta. V ta namen:

1. ultratom vključujejo;
2. varno enota blokoderzhatele;
3. pladenj nameščen na tekočino noža se zbira na površini, ki kosi, pritrdite nož v instrumentu v željenem položaju;
4. prinašajo rezalni rob rezila, ki je najbližje površini zgornja ploskev nabrušeno enoto (običajno se to doseže z "utripajoča vrhunec" ultratome z lučko na gladko površino zgornji ploskvi bloka);
5. napolnite kad s tekočim nožem (pogosto destilirana voda), prejeli prvo polno ročno prestregla predmeta;
6. omogoči samodejno delovanje naprave na želeno debelino rezin;
7. dobljeni odseki montirani na nosilno rešetko in filtrske odvajanje, ki se nahaja v posodi za transport in skladiščenje omrežja z tankih rezinah.

Dobljene ultra tankih delov zahtevajo nadaljnjo obdelavo (kot tudi svetlobo mikroskopsko), da bi ugotovili potrebnih struktur raziskovalnega objekta. Za to tankih oddelke o podpornih mrež se zdravijo z rešitvami nekaterih barvil. Najpogosteje uporabljena za ta namen rešitve svinca in uranil acetatom.
V nekaterih primerih je uspeh študije je odvisna od primerjave podatkov iz elektronske mikroskopije in svetlobno-optičnim študiji, z enako strukturo objekta. V ta namen pripravimo semithin oddelkih 1-2 mikronov (1,000-2,000 nm). Jih je mogoče dobiti ultratome in piramitome. Oddelki so bili nato nameščena na običajnih stekelca za mikroskopiranje in obarvajo v skladu s cilji raziskave. Najpogostejši način je obarvanju semithin odseke z vodno raztopino 1% metilen modrim in 1% natrijevega borata (boraks) (1: 1).
Treba je poudariti, da zgoraj določa le splošna načela za pripravo materiala za preiskavo elektronskim mikroskopom. Za več spoznavanja poglobljeno z metodami elektronske mikroskopije, se obrnite na literaturo. Po našem mnenju dovolj usposobljeni in ob istem času je na voljo, to vprašanje je opisana v knjigi B. Weekley «elektronsko mikroskopijo za začetnike" (Wiley, 1975).