Sanitarna-bakteriološka analiza živil za prisotnost Staphylococcus - mikrobiologija s tehniko mikrobioloških testov

ŠTUDIJA O RAZPOLOŽLJIVOSTI stafilokoki

Stafilokoki so najbolj pogosto najdemo ugodno okolje za razmnoževanje v živilih, ki imajo več beljakovin in škroba (mleko, smetana, sladoleda, sir, namazi, kuhana riba, meso, pire krompir, konzervirane ribe pod olju).
Metode študija. IZDELKI tekoča konsistenca nanesti na trdnem gojišču (1-2 kapljic) in medij za shranjevanje (sol) 0,5-1 ml. debel konsistenco produkta, razredčimo s sterilno vodo iz pipe, trdna - zmeljemo in prahu z vodo v terilnici. Iz pripravljenega emulzije ali drozge pripravimo brisom gram in mikroskopiruyut obarvanih, upoštevajoč prisotnost stafilokoki (enotne, majhna, veliko). Hkrati bi pridelke v pomnilniškem mediju vsebnost 10 in 6,5% natrijevega klorida in vitelline skodelico s fiziološko raztopino agarja (Chistovich mediju).
pomnilniški medij 1
Meso pepton 1 liter
Natrijev klorid 65 g
Agar 1 "
Laktoza 15 "
pomnilniški medij 2
Meso pepton 1 liter
100 g natrijevega klorida
Agar 1 "
Laktoza 15 "
pH 7,4. Steriliziramo pri 120 ° za 30 minuta.

Sreda Chistovich - agar vitelline-sol. agar Meso-pepton z 10% raztopino natrijevega klorida, steriliziramo pri 120 ° C za 30 minut, stalimo, ohladimo na 45-48 °, vol rumenjaka gnojevke (en rumenjaka 150 ml fiziološke raztopine) dodamo 20%, dobro premešamo, vlijemo v skodelice . Medij lahko pripravimo za nadaljnjo uporabo in shranimo v hladilniku.
Pridelki so zbrani v termostatu pri 37 ° C 48 ur. Pozitivni primeri vitelline na agar-agar slane patogene stafilokoke rastejo, da se tvori pigment (sevi, ki tvorijo pigment in različne odtenke oranžne smetane treba upoštevati zlato) in motnost cone okoli kolonije (če lecithinase uničevanje hranilni medij lecitin). Te kolonije smo kultivirajo 1) na krvnem agarju plošče za študij hemolyzing svoystv- 2) na agarju medijem za 16-24 ur formulacije skozi presnovo plazmokoagulyatsii- 3) brozge sladkorja (po 6 urah termostatu pri 37 °) preučevali morfologijo ( majhen koki, acinarna lokacija).
Če po 24 urah pas krvni agar plošče ni bilo videti hemolizo, jih pustimo še 24 ur pri sobni temperaturi. V odsotnosti hemolize Znamka ponovimo subkultura na krvnem agarju posode s setvijo damo v desikatorju, ki vsebuje 20% C02 in damo v termostatu pri 37 °. Po 24 urah rasti atmosferskem C02 izgubil hemolyzing so lastnosti predela. Za tvorbo CO2 na dnu desikatorju 1-2 liter prostornine skodelico na postavljeni z bikarbonatom sode (2,1 g) in fino luknjo skozi levo pipeto vlijemo 16-18 ml 10% klorovodikove kisline.
Iz poševno kulture Staphylococcus sprejme zanko in nanesemo na epruveto z 1: 4 razredčitvi človeške plazme ali citrat zajec krvi. Put v inkubatorju pri 37 ° C in 1 -10 ur opazili vsako uro ravnim koagulacijski videz. V tistih primerih, ko vitelline na agar-agar raztopine (VSA) št rast Staphylococcus sumljivih kolonij, ki posevki medijev za shranjevanje na posodo z agar vitelline-soli in nadaljevati z analizo zgoraj opisanem postopku.
V študiji izdelkov v načrtno se lahko omeji na nekatere osnovne lastnosti Staphylococcus na sliki. V primeru zastrupitve s hrano je bolj podrobno študijo izoliranih sevov Staphylococcus, tj. E. Določanje prisotnosti toksina in stopnjo hemolitično aktivnost.
Biološki vzorec je opisan v "Private Microbiology" (str. 202), lahko pa uporabimo naslednji postopek. Izoliran Sev inokuliramo na ploščah aureus z 0,75% agarja v telečjega infuzijski brozgi ali na Hottinger brozge z 0,25% glukoze (pH 7,0). V skodelice damo v eksikatorju z 20% C02 in damo v termostatu pri 37 ° C 2 dni na glavo. Po 48 urah, sklenjeno in površino agarja se vlije 10 ml fiziološke raztopine. Agar zdrobiti z lopatico do pastozna konsistenca in pustimo na sobni temperaturi 2 uri. Po ekstrakt smo prenesli v epruvete in centrifugirali, da dobimo bistro plast, ki jo odsesamo. Segrevamo v vreli vodni kopeli 30 minut in dajemo mačkam v ušesnem veno ali femoralno veno v količini 0,5 ml na 1 kg telesne teže. Pojav bruhanje in drisko ali bruhanje samo, v nadaljnjem obdobju od 30 minut do 3 ur, kaže na prisotnost toksina. 12-2 ali prometa mesecu mladiči in tešče dajanje, odpipetiramo v usta 15-20 ml Negrete toksina pomešamo z mlekom ali smetano. 30-60 minut začne bruhanje, včasih driska in splošna oslabelost. Opazovanje poteka 4-5 ur. Lahko vnesete bele miši toksina skozi cev v požiralnik.
Za dokončno potrditev vloge v etiologiji izbrani stafilokoknim zastrupitve s hrano je to potrebno postaviti aglutinacijskim reakcijo s serumom krvi bolnika. Kot antigen sprejme izoliranega seva Staphylococcus. Reakcijsko so postavljeni na vrsto reakcije Widalovega, začenši z razredčenjem 1: 50 do 1: 800. Kot kontrolo, je zaželeno postaviti aglutinacije reakcija je zelo dobro znan toksični seva.
V zadnjem času, proizvaja fagni tipkanje patogenih stafilokokov, ki omogoča, da ugotovi identiteto kultur, izoliranih iz različnih lokacij in z različnimi ljudmi, kar je pomembno za zdravstvene storitve.