Priprava jedi, kuhanje fiziološko raztopino - mikrobiologijo s tehniko mikrobioloških testov

Priprava jedi, KUHALNA snopu zastoji in fiziološke raztopine
Posoda. Stekleni izdelki (žimnice, vial, cevi in ​​podobno. D.) se pogosto uporabljajo v mikrobiološki laboratorij za mikrobiološko gojenje v medijih hranil, in za druge namene. Pred uporabo je treba jedi se ustrezno pripraviti. V ta namen rabljeno sterilizirani jedi, izperemo s toplo vodo uporabo ovratnik ali krtačo, po kateri 2- speremo 3-krat z destilirano vodo in posušimo.
Če je mogoče z običajnim pralnim posode s težavami, je obdelujemo 30 minut z mešanico kromove (v 1 liter vode in 50 g kalijevega dikromata, 100 g žveplove kisline tehnične kakovosti) in nato dobro speremo z vodo.
Jedi s sledovi agar, želatina in druge kulture, medijev, se lahko namoči čez noč pred pranjem v raztopini luga. Za uporabo razbarvanje barvo razveljaviti 3% raztopino belila.
Jedi se uporabljajo za medije hranil, ni mogoče obdelati razkužila. Nedavna dodatek naredi plodna tla neprimerna.
Sušenje naj jedi v pečici ali sušilniku v sobi temperature do 50 ° in dobro prezračevanje.
Ušesne svečke. Suhe cevi, steklenice, fiole, steklenice zaprta z bombažnimi čepi, ki so bili pripravljeni na naslednji način. Na mizo podolgovate pravokotne plošče, ki ustreza vrednosti volne so zložene navznoter vse štiri robove (sl. 25), tako da dobimo trak širine enak dolžini cevi in ​​valjane cevi bisernih premer ali bučk. Bombažna čep mogoče oviti s kosom gaze v enem sloju. Konci gaze tie zunanjost vtiča nit. Trenutno je na voljo v posebnih strojih, stroji za proizvodnjo bombaža svečke.
Saline. Za 1 liter destilirane vode traja 8,5 g soli raztopimo pod refluksom, ohladimo, filtriramo skozi filtrirni papir in steriliziramo v avtoklavu pri 120 ° C 20 minut.
Uporaba pipet. Mikrobiološki laboratorij se pogosto uporablja pipete. Pasteur pipete so in razvrščanjem. Najprej delitev in obračun tekočine pri delu z njimi pa na drugem kapli- se delimo, in količino tekočine, ki teče od njih je določena v mililitrih, desetinkah mililiter, itd One koncu pipete, drugi - .. ozke. Za ureditev se njihov konec pipete, zaprite kazalcem in odkriti dovolj le počasi pušča prišlo. Pipeti vtič bombaža do konca, ki je sprejeta v ustih. Ball iz volne ne bi smelo biti preveč tesen, vendar ne sme prosto gibati v pipete. Volnena vlakna ne štrlijo iz roba pipete, saj jim ni bilo dovoljeno, da tesno sponko zadnji prst. Panelisti kose volne se lahko zažgejo na plamen gorilnika. Pipeti enem ali več kosov zavita v papir in sterilizirane. Pri delu z okuženega materiala v zgornjem (širok) konec pipete nadalje pogosto obrabljene gume cev ali žarnica, skozi katero in proizvajajo nasasyvanie.

Sl. 25. bombaž čepi regresije.

Sterilizacija in njegove vrste

Popolna sprostitev objekta materiala iz gojišča brez izjeme mikrobov imenovanih sterilizacija (sterilizacija). Pojem "sterilizacije" širši pojem "dezinfekcijo", saj je ta imel v mislih samo uničenje patogenih mikrobov. Naslednje vrste sterilizacije: 1) visoke sterilizacija temperaturoy- 2) mehansko sterilizacijo.

1. Sterilizacija visoke temperature se izvaja na različne načine:

a) plamen žganje gorilnika - najhitrejši in najzanesljivejši način za sterilizacijo, vendar ima omejeno uporabo, saj večini predmetov z žganjem poslabša. Žganje sterilizirani platina zanke, igle in majhno kovinsko žličko in stekleni predmeti, kot so pincete, tobogani, pipete, in tako naprej. Etc.-
b) temperaturo - najenostavnejši način sterilizacije. Z vre 30 minut sterilizirane injekcijske brizge, kirurški instrumenti, in tako naprej. N. dodajanjem vode do 1% natrijevega ščiti instrumentov proti rji in hkrati povečuje zanesljivost sterilizacijo. Vendar pa ta metoda ni povsem zanesljiva, saj lahko spore nekaterih bakterij traja predolgo kipyachenii-
c) steriliziranje para tekočina proizvedena v tekucheparovom Koch stroju. Ta naprava (sl. 26) je pločevina cilinder z dvojno steno, konično zgornji pokrov pokriva. Da bi zmanjšali Priprava za prenos toplote je ovita navzven klobučevine ali azbest. Pokrov ima luknjo, kjer se vstavi termometer. Ta enota vsebuje prosto kositer odstranljivi Korec (za sterilizirati materiala), so stene in dno katere opremljena z luknjami.
Na notranji strani valja pri različnih višinah obstajajo štrline, ki so dane naslednje luknjast pločevine. Na dnu vode vlijemo v napravo, vstavljanjem v napravo predmeti za sterilizacijo, in segrevamo, dokler zgornji del luknje ne bo močnim curkom parametri, medtem ko je temperatura v napravi postane enaka 100 °. Ogrevanje je nadaljeval pri 100 ° C 30 do 60 minut. Za večjo zanesljivost, kot tudi za sterilizacijo nekaterih snovi, ki spremenijo svoje lastnosti po daljšem učinkovanju visoki temperaturi (želatina, sladkor, in drugi), kot ogrevanje na splošno proizvajajo tri dni zapored 30-60 minut (delno sterilizacije). Ko so ubili prvi oblike toplote vegetativnih bakterij, vendar spore lahko preživijo. Do naslednjega dne spore kalijo in postanejo vegetativnih oblik, še posebej, če je predmet sterilizirati dni pri temperaturi, ki ni nižja od 20-22 °. Sledi ogrevanje ubili novonastalih vegetativnih oblik. Ker je možno, da nekatere spore kalijo ni pravočasno, se material pustiti nadaljnjih 24 ur pri sobni temperaturi in nato podvržemo tretjo sterilizacijo.

Sl. Koch 26. Naprava za pare sterilizacije tekočine.

Sl. 27. Navpični avtoklav.

Torej, običajno sterilizacija aparati Koch 3 dni zapored 30-60 minutes-
g) parno sterilizacijo izvedemo pod tlakom v avtoklavu (sl. 27 in 28), ki je zgrajen na principu papinova kotla. Avtoklav smo najprej v praksi naša rojaka Geidenreich leta 1884. Sestavljen je iz masivnega valjastega bakrenega kotla z vgrajenim lupino pločevine. Kotel je zaključena hermetično kovinski pokrov tesno priviti z vijaki. Na pokrovu in včasih v steni avtoklavu (glede na konstrukcijo) ima več lukenj: manometer, varnostni ventil in izstopne ventile za paro.
Znotraj bakra kotel se vstavi v drugo pot, tako da je dovolj prostora še vedno med njimi. Med kotlovske vode vlijemo skozi tok vstavljene v merilnem voda cevi. vodomer cev je ojačana v lupini. Nivo vode v avtoklavu bila voda-odmerni cev, ki je postavljena na isti višini v skladu z zakonom veznih posod. Na zgornjem robu prostor med stenami kotla skozi vrsto ustij komunicira z notranjostjo kotla. Para se dviga med kotlom stene preko zgornje odprtine, sega v prostor sterilizacije in skozi sterilizirano materiala se nato odvaja preko izstopnega ventila.

Sl. 28. avtoklav vodoravna.
Sterilizacija v avtoklavu se izvaja kot sledi. Avtoklav smo vlili v vodo. Izdelki, ki se sterilizira (Bix, gojišča, in tako naprej. D.), nameščen v kotliček, ki je pokrov priviti, neuspeh, da se odpre izpustni ventil in voda segreje. Ko se voda segreje, se začne pojavljati iz parnega pipe skupaj z zrakom. Potrebno je, da se ves zrak premakne za pare, saj sicer manometer ne ujema s temperaturo. Ko je temperatura v kotlu doseže 100 °, pipa začne sredini parnim curkom. Ko bo para izpodrine ves zrak iz avtoklava, gre skozi pipe pare polnem piskajočem toka, ki ne vsebuje vlage (suho paro). Nato je pipa zaprta. Hlapi ne gre ven, in vstopi v zaprt prostor in se kopičijo v vse večjem številu, povečuje pritisk, medtem ko je v istem času in temperaturi, kot je navedeno, ki jih manometer in termometer. Pri tlaku 2 bar. (Vključno normalni tlak) temperatura znaša 120 °, pri tlaku 3 atm.-134 °. Ko tlak doseže ustrezne meritve (običajno 2 atm.) Za ureditev začetek ogrevanja držite pritisk na tej ravni za 20-30 minut, nato pa je ogrevanje ustavil in čakal, ko merilnik tlak zniža na nič. Previdno proizvodnjo pare, pokrov odpre in snetje.

Sl. 30. Naprava za sterilizacijo z vročim zrakom.

Sl. 29. Pečica Pasteur.
Če steriliziramo tekočino ventil ni treba odpreti, preden se nadtlak doseže vrednost nič. V nasprotnem primeru se zaradi hitrega padca tlaka tekočine, da zavre, "vrgel" bombaž vtič sam bo razlila plovil. Za krmiljenje delovanja avtoklavu različne snovi, ki imajo določeno tališče, npr benzonaftolom - temperatura tališča 110 °, -113 ° antipirina, resorcinol in žvepla - 119 ° in -120 ° benzojske kisline. Pri testiranju v stekleni cevi dolžina 6 cm 5-, zapečatena na enem koncu, zlijemo iz ene od zgoraj navedenih snovi dodamo malo suhe anilina barvilo (fuchsine, safranine, brilliantgryun et al.) In cev zatesnimo. Cev s praškom damo v avtoklavu sterilizirani med predmeti. Če je temperatura dovolj visoka, se material topi in svetlo pobarvane v barvi, ki se ujema sprejeti kraske-
d) Sterilizacija s suhim proizvodnjo toplote v peči Pasteur (sl. 29), ki je kositer omara z dvojnimi stenami zunanjega krmilnega azbesta z grelno napravo električnim. Segreti zrak kroži v prostoru med dvojno steno in skozi eno ali skozi več posebnih lukenj. Vroč zrak greje predmete, ki so v omari. Sterilizacija s suho toploto naj traja 1 uro pri 160 ° ali 3/4 ure pri 165-170 °. Regulacija temperature se izvaja na termometru. Zagon sterilizacija se meri od trenutka, ko je termometer 160-165 °.

V trenutno proizvedene električne stroje, različnih oblik in opremljen z dobro toplotno izolacijo, je potrebno temperaturo avtomatsko vzdržujejo s termostatom, katerih delovanje nadzoruje nadzorni žarnico (sl. 30).
Sterilizacija Pasteur peči izpostavljeni vse steklovine, Pasteur pipete, papirja in volne v majhnih paketih. Sterilizaciji suhe cevi in ​​bučke zaprti z bombažnimi svečke, tako da po sterilizaciji bakterije iz zraka pridobivanje notri. Skodelice Geidenreich eno ali več zavit v bumagu- to pipetiranje in voronkami-
e) tyndallization uporablja za sterilizacijo snovi giblje pod vplivom temperature 100 °. Ti predmeti so izpostavimo segrevanju 5 zaporednih dni do 1 uro pri temperaturi 56-58 °. Tyndallization proizveden ali v vodni kopeli ali v posebnem priborah-
g) pasterizacija - sterilizacija pri 60-70 ° do Pasteur bessporovyh za ubijanje mikrobov v teh tekočinah, ki se spremenijo in poslabšajo pri višjih temperaturah (vino, pivo, mleko) uvedena. Pogosto uporablja pasterizacijo mleka, saj takšne sterilizacije pri temperaturi, ki ni višja od 65 ° ohrani svojo okus in hranilne lastnosti.
Naprava za strjevanje seruma. Aparat je kositra polje z dvojnimi stenami, med katerimi je napolnjena z vodo (sl. 31). Spodnji del stroja nagnjena k cevi, se lahko postavi v nagnjenem položaju. Zunaj je ovita azbest in zaprt z dvema pokrovi, iz stekla, da bi lahko opazujemo proces strjevanja medij in top - metal. V zgornjem delu škatle odprtino, skozi katero se vlije vodo. Voda v aparaturo segrejemo na temperaturo 80 do 90 ° plinskim gorilnikom ali električnih naprav. Pri tej temperaturi grelno proizvaja zaporednih 1 uro 3 dni.

Sl. 32. Seitz filtra.

Sl. 31. Naprava za strjevanje seruma.
Ta naprava uporablja za koagulacijski seruma, kot tudi za pripravo številnih jajce gojišča, kjer istočasno z utrjevanjem mediju njena sterilizacija.

1. Mehanski sterilizacija. Izdelava sterilizacija se doseže z uporabo bakterijskih filtrov pripravljene iz fino poroznega materiala. Mikrobi ne more prodreti skozi te pore. Obstajajo različne bakterijske filtrov. Najpogosteje uporabljena Seitz filter (sl. 32) in membranske filtre.

Seitz filtri so sestavljene iz plošče azbestnih pike različnih velikosti, ki se vstavi v posebne imetnike kovin.
Za filtriranje vsak filter je treba posebej nameščen - nosi njegov s sprejemnikom, ki se dogaja na filtrata. Sprejemniki lahko služi kot steklene valje z vsebnikom stransko in širijo kot dnu lijaka. S črpalno cev zraka dobimo z vodnim curkom ali druga črpalka. Kot prejel tudi ravnim dnom stožčaste posode s stransko razširitvijo okovja na vrhu, skozi katero črpa zrak.
Za namestitev ploščo Seitz filtri so imetniki kovine. Izdelane so iz ponikljane kovine in je sestavljen iz dveh delov, zgornjega dela valjastih brez dna in dnom, dno pa privit aparat in posebnimi vijaki. To je v sredini dna se zožuje proti ozko cevko, ki služi za filtrat odteče. Med dvema deloma tesno vpet azbesta plošče, naneseno na kovinsko mrežo, ki služi kot podpora njo. Celotna enota steriliziramo v avtoklavu.
Po sterilizaciji ob stiku z zamaškom sprejemnih mestih in pregledovanje cevi morajo biti tesno povezan in parafin vgrajeni.
Membranski filtri so porozni nitroceluloza folija v obliki kolutov 35 mm, debeline 0,1 mm in podobni tanek bel papir. velikost por razlikovati velik-pore in majhne pore filtrov. Odvisno od permeabilnosti so naslednji filtri: № 1, 2, 3, 4 in 5. najbolj gosto Filter - № 1, najbolj ohlapno - № 5.
Tudi ti filtri se izprazni tako imenovani predhodni filter, katerega namen je čiščenje vode iz grubovzveshennyh delcev. Najbolj običajna praksa v № 3 filter s premerom por od 0,7 mikrona (User Equipment membranskih filtrov je opisan na str. 436 v "setvi vodo na membranske filtre« prerez).