Načela gojenje mikroorganizmov - Mikrobiologija s tehniko mikrobioloških preskusov

POMEMBNA gojenje mikroorganizmov

1. Setev na poševni kapi. Z desno roko ob zanko in spali na vročem plamen gorilnika. Levo roko med palcem in kazalcem drži cev agar skoraj v vodoravnem položaju, tako da je med to setev ni dobil klic iz zraka. majhnim zasukom sprosti zamašek iz bombaža in mezincem z desno roko, ki ima dlani, jo odstranite iz cevi. Rob cevi je rahlo zgorela. Zanka traja nekaj materiala, ki vsebuje mikrobe in cikcakaste gibe, ki se uporabljajo na površini agar vitro. Po cepljenju proizveden zanke odstrani iz epruvete, opeklina robove in pokrijemo s bombažni vložek. Potem spet gorijo zanko v plamenu gorilnika, da se uniči mikrobe preostale na njem.
2. Peres postrani. Material, ki vsebuje mikrobi prav tako shranjeni v ceveh. Da bi ponovno zasaditev ene cevi v drugo, dve cevi, tj. E. eden od katerega ste sajenje, in enega, ki je predmet sejanje, skupaj in je potekala med palcem in kazalcem in sredincem z levo roko. Po odstranitvi cev iz prve cevi z zgoraj navedeno metodo, so vedno bolj materiala in prenos materiala na površino sterilnega agar, kjer inokulirano so bile cevke nato pečen robovi in ​​zaprta (sl. 33).
3. Setev na zalogi. Setev na zalogi ali juho, da juho ali agar, kot tudi setev na agar, vendar vse manipulacije je treba skrbno storiti tako, da se juha ne razlila iz cevi ali ne navlažili njene robove. Material uvedemo brozge semenske trituriramo v cevi stene, ki je najbližji tekoči brozgi in mešamo. Subkultura od brozge v juho je mogoče storiti tudi z sterilno Pasteur pipete.
4. Sejanje mleku in drugih hranil (tekočine) medij izdelana na enak način kot seme v brozge.
5. Sejanje kurca v agarju kolonsko ali želatina. Agar cev ali želatino bodo spodaj navzgor. Material za sejanje odjem platine iglo, ki injicirana pravokotno na površino agarja ali želatina in premika vzdolž osi cevi do dna. Igla nato predela in kalciniran zaprti cevi zamašek (sl. 34).

V zunanjem okolju in v telo mikrobi človekovih najpogosteje najdemo v kombinaciji z drugimi mikrobov. Za študij lastnosti mikroba (brez katerih ni mogoče diagnosticirana) mora biti v čisti kulturi, t. E. Pri tem je treba ločiti od drugih bakterij, ki ju zmešamo.

Sl. 33. Sejanje zanka.

Sl. 34. Sejanje kurac.

Sl. 35. Izlivni agar plošče.
Obstajajo naslednje metode za izolacijo čistih kultur bakterij:
a) sajenje v sredo v pokalu Geidenreich - Petri-
b) biološke metode (z uporabo medija za izbiro, uporabo različnih optimalni temperaturi, okužba poskusnih živali). Najpogostejši Uporaba materiala v mediju sajenje v čaše Geidenreich - Petri.

1. setev oprema za pokal Geidenreich - zmrznjene jedi z agar. Agar v posodah, steklenice, cevi, stalimo v vreli vodni kopeli. Potem smo agar ohladimo na 50-60 ° C in zlili v skodelice Geidenreich - Petrijevimi. Skodelice morajo biti sterilni. Ti so nameščeni na vodoravni površini, in iz posode, ki vsebuje agar staljene je čep odstranjen, rob posode žgemo, nakar smo medij zlijemo v skodelico (sl. 35). Pokrov pokal dvignil svojo levo roko na eni strani, ne da bi v celoti odpiranja skodelico. Rahlo nagibanje skodelico v različnih smereh, se razdeli zlijemo agarja enakomerno po dnu. Ko se agar strdi, skodelice postavi v termostat z glavo navzdol za sušenje. Koristno je tudi, da odstranimo sterilno bombaž kondenzirane vode, zbrane na pokrovu skodelice. Setev na agarske plošče, proizvedene s pomočjo na dotik zanko ali drgnjenje stekleno lopatico. Pri njihovi izdelavi zahtevano debelino stekleno paličico (4- 5 mm) se dovaja v plamen gorilnika segrevali zmehča, je konec zavihanimi in predgretega ploskozubtsami dajejo trikotno obliko (sl. 36). Skoraj bolj primerni za uporabo v kovinski lopatica Drygalski.

Sejanje zanka sledi. Platinum zanko dobiček majhna količina materiala se lahko izvaja agar površino z uporabo niza vzporednih linij. Enako zanka materiala brez ponovno klicanje dotakne velja za drugo in tretjo agar ploščo. V prvem skodelico lahko obrnejo solidno rast, medtem ko je v drugem in tretjem vzponom posameznih, izoliranih kolonij. Vsaka družina je ločen kopica podobnih mikrobov. Lahko uporabite tudi eno skodelico, ga delimo na več sektorjev, ki povzročajo ločnico stekleno dno skodelice.

Sl. 36. lopatice Drygalski.
Vsak posamezni sektor bo nadomestila eno skodelico. V naslednjem posevki kolonij na agar naklona ali drugem mediju hranil so čista kultura.
Pri setvi lopatico na agarju površino nanesemo kapljico preskusne zanke materiala. Nato odpiranje skodelico in kalciniran ostuzhennym stekleno lopatico trituriramo padec po vsej površini, ki proizvajajo lahke gibanja božanjem čez agar površini (sl. 37). Brez gorenja lopatico, se cepimo drugo in tretjo agar plošče.

Sl. 37. Sejanje lopatico.

Biološke metode za izolacijo čistih kultur. Izolacija čiste kulture na osnovi različnih bioloških lastnosti bakterij običajno izvajajo na posebne medije hranil. Na primer, so posebni mediji pogosto uporabljajo pri dodeljevanju sredstev za črevesne okužbe. Dodatek k gojitvenem mediju ali malahitno briljantno zeleno, žolčnih soli, pomembne koncentracije soli ali soli citronske kisline inhibira rast bakterij Escherichia coli in ne vpliva na širjenje patogenih bakterij kishechnotifoznoy filter. Za izolacijo iz sputuma in sluz kulture pertusisnih palic smo gojišče dopolni z penicilina antibiotikom, ki inhibira rast spremljevalnih mikroflore in hkrati ne zadržuje rast in reprodukcijo patogena oslovskega kašlja. Za izolacijo Vibrio cholerae z uporabo selekcijskega medija, - pepton vodo in izolacije davici Bacillus - valjani konjski serum.

Za lažjo izolacijo čistih kultur nekaterih bakterij lahko izkoristijo dejstvo, da rastejo pod različnimi temperature Optima. Kot primer, postopek za izolacijo čiste kulture bakterije Escherichia coli iz vode z posevkov v termostatu pri 43 °, povzročitelj kuga izolacije kontaminiranega materiala z gojenjem pri temperaturi 20 ° in celo pri 5 °.
Na koncu je treba poudariti, da je rast nekaterih patogenih bakterij (Streptococcus pneumoniae, antraks, tularemijo bakterije idr.) Se lahko dobimo v čisti kulturi, okužil laboratorijskih živali dovzetne ali drugih mikrobov. Na primer, da se poudari kulturo pnevmokoknega iz bolan človek sluzi proizvaja okužil bele miši.

termostat

Sl. 38. termostati.

Cepimo medij damo v peč, kjer je temperatura najbolj ugodni za gojenje mikrobov. Za patogenimi bakterijami, mora ta temperatura ustreza telesni temperaturi ljudi, tj. E. 37 °. Električna pečica z avtomatskim uravnavanjem temperature so različni razmerov- od velikosti majhne škatle z vrednostjo prostora. Termostat za bakteriološko rutinsko delo je omara z dvojno steno kovine ali lesa, usnja zunaj slabi prevodniki toplote, kot so plute, azbesta in tako naprej. N. (sl. 38). Termostat ima dvojna vrata, zunanjim z izolacijsko plastjo oplaščen in notranji okvir s steklom. Termostat razporejen znotraj policah kovinsko mrežo.

Video: Setev mikroorganizmov in vode 1 lekcije iz biologije HOUSE